GPI锚定修饰的慢粒白血病bcr/abl和鼠IL12真核双表达质粒的构建及表

陶崑,王东,曾建明,黄世峰

知网,万方

目的： 构建由糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定修饰的bcr/abl和鼠IL12（mIL12）真核双表达质粒，在COS7细胞中检测其基因和膜蛋白表达. 方法： 以含有慢粒白血病（b3a2型）migP210全长序列的质粒为模板，通过PCR扩增获得654 bp的bcr/abl融合基因片段，酶切后插入pBudCE4.1空载中，经鉴定获得重组质粒pBB. 同时，RTPCR扩增人外周血淋巴细胞CD24分子中的GPI锚定序列，酶切后克隆入pBB质粒中与bcr/abl基因片断羧基端相连，获得重组质粒pBBG并鉴定.。