幽门螺杆菌尿素通道蛋白基因UreI载体的构建、融合表达及纯化

杨丽娟，姜政，向廷秀，陶小红，王丕龙

知网,万方

目的 构建幽门螺杆菌(H.pylori, Hp)尿素通道蛋白基因UreI的融合表达载体，并在E.coli BL21中表达，为进一步研究UreI的功能奠定基础。方法 利用分子克隆技术以Hp DNA染色体为模板，扩增Hp UreI基因片段，将目的基因UreI与载体pET32a(+)分别经kpnⅠ和HindⅢ双酶切，纯化，连接。筛选阳性重组载体，转化大肠杆菌BL21，以IPTG诱导表达pET32a(+)/UreI融合蛋白。表达产物经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后，用SDS-PAGE及Western blot分析。。