大肠癌转移淋巴结构建人源性抗大肠癌噬菌体Fab抗体库

大肠癌;噬菌体;抗体

刘锐 孙立娟 何成彦 周劲松

知网,万方

目的 构建人源性抗大肠癌噬菌体Fab抗体库。方法 术中剥取老年大肠癌患者系膜内转移淋巴结，提取细胞总RNA，逆转录合成cDNA，进行PCR，克隆于pComb3 载体,再经电转化大肠杆菌XLIBlue菌株,形成噬菌体抗体库，最后通过免疫印记法鉴定初级抗体库中噬菌体上有Fab段的表达。结果 从系膜内转移淋巴结中扩增出650 bp重链Fd和轻链基因产物，轻链基因产物插入测得转化菌数为4.7×106，鉴定插入率为70%;重链Fd基因产物测得转化菌数为3.5×106，插入率为60%;免疫印迹法鉴定成功建立噬菌体F。